PCR熒光分析顯微鏡是由激發(fā)濾光片,二向色鏡以及發(fā)射濾光片組成的光學儀器,通常被設計來匹配特定熒光團或熒光蛋白的光譜。同時濾光片也可能會安裝在一個轉輪(稱為濾光片轉盤)上組成一個多通道濾波片組合。
濾光片輪盤您可以混合搭配,盡可能匹配我們所需要的激發(fā)和發(fā)射波長。最終的作用是是捕獲到希望從結合靶標的熒光基團光束上捕獲的光信號,同時盡可能屏蔽其它部分的任何光線(環(huán)境光,激發(fā)光源等)干擾。
PCR熒光成像使用的濾光片有哪些類型呢?
通常情況下,濾光片組被設計成可用于捕獲制定熒光團的最大激發(fā)和發(fā)射波長,但不會捕獲所有的熒光。
多數現代化濾光片組的設計旨在確保激發(fā)濾光片允許制定波長區(qū)間的光線通過。這種類型的濾光片稱為帶通濾光片。
帶通濾光片通常通過中間波長和區(qū)間寬度確定。在較為簡單的熒光顯微鏡裝置中,一旦激發(fā)光線離開激發(fā)濾光片,即會照射到靶標上,靶標上的熒光激團隨即變?yōu)榧ぐl(fā)狀態(tài),然后發(fā)射向光譜的紅外端(相對于激發(fā)光線)遷移的光線,并非所有此類發(fā)射光線都會被檢測器捕獲到——僅哪些允許通過二向色鏡且能通過發(fā)射濾光片的光線。
發(fā)射濾光片通常為帶通濾光片或者長波通濾光片,具體取決于特定的熒光團和成像實驗。如果您希望讓超過特定波長的光線通過檢測器,可選擇長波通濾光片。
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