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流式細(xì)胞儀濾光片在儀器中的原理和應(yīng)用

2020-01-28 13:40:17 NMOT

流式細(xì)胞術(shù)是一種細(xì)胞分析技術(shù)用于測量細(xì)胞體積,可在細(xì)胞隨快速流動的流體直線通過觀察孔時進(jìn)行檢測。在流式細(xì)胞儀中,溶液中的細(xì)胞快速度的通過儀器的檢測熒光(或者其他波段的)光束,進(jìn)而對細(xì)胞進(jìn)行檢測。


流式細(xì)胞儀主要是由3個主要組成部分組成的:

1.流體學(xué)系統(tǒng)、

1.光學(xué)系統(tǒng)、

3.電子學(xué)系統(tǒng)、

它們共同構(gòu)成了完整的細(xì)胞分析系統(tǒng),其中光學(xué)系統(tǒng)的光學(xué)元件包括激發(fā)光源、光學(xué)透鏡和流式細(xì)胞儀濾光片以及用于產(chǎn)生光電流的檢測系統(tǒng)。


流式細(xì)胞儀的工作原理是:將待測細(xì)胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中,在氣體的壓力下進(jìn)入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,形成細(xì)胞柱。

流式細(xì)胞儀通常以激光作為發(fā)光源,經(jīng)過聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下,產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。

熒光信號由被檢細(xì)胞上標(biāo)記的特異性熒光染料受激發(fā)后產(chǎn)生,發(fā)射的熒光波長與激發(fā)光波長不同。每種熒光染料會產(chǎn)生特定波長的熒光和顏色,通過波長選擇通透性濾片,可將不同波長的散射光和熒光信號區(qū)分開,送入不同的光電倍增管。選擇不同的單抗及染料就可同時測定一個細(xì)胞上的多個不同特征。


流式細(xì)胞儀濾光片在儀器中的功能和應(yīng)用:

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